Localización de los elementos transponibles het-a en la arquitectura nuclear de células de drosophila melanogaster en interfase
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Date
2019
Authors
Director
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Publisher
Pontificia Universidad Javeriana Cali
Abstract
Durante la división celular, cada ciclo de duplicación del genoma lleva a un acortamiento de los extremos de los cromosomas causando la perdida de regiones genómicas importantes. La célula cuenta con un mecanismo de protección en el que la enzima telomerasa añade secuencias repetitivas en los extremos de los cromosomas para así preservar su integridad. En Drosophila melanogaster, el elemento transponible HeT-A se inserta en los extremos de los cromosomas remplazando la acción de la enzima telomerasa. Si bien la inserción de elementos transponibles en regiones aleatorias en los cromosomas puede tener efectos deletéreos como el cáncer, se ha determinado que la inserción dirigida a regiones cromosómicas específicas puede tener funciones reguladoras. Matrices de regiones repetitivas pobres en genes como las regiones centroméricas y teloméricas suelen unirse a la membrana nuclear de la célula en interfase y los elementos transponibles parecen jugar un papel importante en esta localización. En esta investigación se busca determinar mediante inmunofluorescencia (IF) acoplada a hibridación in situ de fluorescencia (FISH) si el elemento transponible HeT-A se localiza en la membrana nuclear de células S2 de Drosophila melanogaster. Además, establecer si dicha localización sufre alteraciones bajo una condición de estrés. Concluyendo que el estrés térmico afectó la proliferación celular de células S2, esto puede deberse al aumento de la expresión de proteínas de respuesta a choque térmico que estarían afectando ciertas vías de señalización que favorecen la detención del ciclo celular en los puntos de control.
Description
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In cell division, each cycle of replication of the genome generates a shortening of the ends of the chromosomes, which would cause the loss of genomic regions of importance. To counter this, the cell has a mechanism of protection in which the enzyme telomerase adds repetitive sequences at the ends of the chromosomes in order to preserve their integrity. In Drosophila melanogaster, the transposable element HeT-A is inserted at the ends of the chromosomes, replacing the action of the enzyme telomerase. Although the random insertion of transposable elements along the chromosomes may have deleterous effects such as cancer, it has been determined that insertions directed toward specific genomic regions may confer regulatory functions. Matrices of gene-poor repetitive regions like centromeric or telomeric regions could be localize at the nuclear membrane during interphase. Therefore, it was searched whether the transposable element HeT-A is localized at the nuclear membrane during interphase in S2 cells by immunofluorescence (IF) - fluorescence in situ hybridization (FISH) or to other nuclear locations, as a regulator of gene expression. Additionally, establish if such location suffers alterations under a stress condition. Concluding that thermal stress affected cellular proliferation in S2 cells, this could be caused to an increase in the expression of heat shock proteins that are affecting certain signalling pathways that favor cell cycle arrest at checkpoints
Keywords
Membrana nuclear, Estrés térmico, Proteínas de respuesta a choque térmico, Detención del ciclo celular Nuclear membrane, termal stress, Heat shock response proteins, Cell cycle arrest